Средство для лечения фиброза тканей на основе компонентов секретома мезенхимных стромальных клеток, способ получения и применения средства
Patents
| Language: |
Русский |
| Type: |
Invention |
| Number |
RU 2766707 C1 |
| Request number: |
2020137359 |
| Request date: |
Nov 13, 2020 |
| patent.field.start_date: |
Nov 13, 2020 |
| Registration date: |
Mar 15, 2022 |
| patent.field.request_publication_date: |
|
| Authors |
Ткачук В.А.
,
Акопян Ж.А.
,
Ефименко А.Ю.
,
Арбатский М.С.
,
Басалова Н.А.
,
Григорьева О.А.
,
Зайцев И.Л.
,
Калинина Н.И.
,
Новоселецкая Е.С.
,
Попов В.С.
,
Сагарадзе Г.Д.
,
Тарасова Е.В.
|
| Affiliations |
|
Изобретение относится к области молекулярной и клеточной биологии, медицины и фармакологии, в частности к лекарственному средству для лечения фиброза тканей, способу его получения и способу лечения фиброза, вызванного повреждением тканей, с использованием указанного средства. Лекарственное средство содержит фракцию внеклеточных везикул в составе секретома мезенхимных стромальных клеток (МСК) или изолированную фракцию внеклеточных везикул, выделенных из секретома МСК, имеющих поверхностные маркеры HSP70, CD9, CD81 и CD63, а также размер диаметра от 20 до 420 нм, в количестве 1-3*10^10 частиц на мл. Внеклеточные везикулы переносят в своём составе особые микроРНК. Для осуществления способа получения указанного лекарственного средства сначала культивируют МСК человека до 90% конфлюэнта или монослоя в среде, поддерживающей рост недифференцированных мезенхимных клеток человека. Затем отмывают клетки буферным раствором и кондиционируют МСК в бессывороточной и лишенной продуктов животного происхождения среде роста, поддерживающей жизнеспособность клеток не менее 70% и пригодной для терапевтического применения, в течение 2-7 дней. После этого проводят отбор среды культивирования, содержащей продукты секреции МСК ЖТ человека, удаление из нее остатков клеток и очистку от низкомолекулярных компонентов с последующим концентрированием с использованием ультрафильтрации. Далее проводят оценку указанной среды на содержание фракции внеклеточных везикул, имеющих поверхностные маркеры, определение размера и количества частиц на мл, а также оценку наличия в их составе указанных микроРНК. При этом для получения фракции внеклеточных везикул в составе секретома МСК человека используют фильтры 10 кДа, а для получения изолированной фракции внеклеточных везикул, выделенных из секретома МСК, используют фильтры 1000 кДа, с допустимой величиной погрешности не более 5%. Настоящее изобретение позволяет расширить арсенал средств, эффективно подавляющих фиброз тканей или предотвращающих развитие фиброза тканей. 3 н. и 25 з.п. ф-лы, 16 ил., 4 табл., 10 пр.